Assassin's Creed: Brotherhood is het vervolg op Assassin's Creed II. Je speelt als Ezio, de held van het vorige spel, die nu in Rome vecht tegen de Tempeliers.
Ezio moet de macht van de Tempeliers breken door hun centrale macht te verzwakken. Hij doet dit niet alleen, maar met een team mede-assassijnen. Samen moeten ze strategieën bedenken en uitvoeren om de Tempeliers te verslaan.
In dit spel kun je voor het eerst online spelen. Je kunt samenwerken met andere spelers om Tempeliers te verslaan of tegen elkaar spelen in verschillende spelmodi. Je kunt zowel een assassijn als een doelwit zijn.