Je speelt als lid van het CSI-team en lost vijf moorden op die met elkaar verbonden blijken te zijn. Het verhaal leidt je uiteindelijk naar Queen of the Hive, een machtige drugsbaron achter de misdaden. Je werkt daarbij samen met FBI-agent Gene Huntby, die je uitdaagt om bewijs te verzamelen en verdachten te ondervragen.
Om de zaken op te lossen gebruik je geavanceerde technieken zoals vingerafdrukken, digitale SLR-fotografie en ultrasone analyse. Elke zaak vereist DNA-onderzoek, microscopisch onderzoek en videoanalyse om cruciale hints boven water te krijgen. Verdachten ondervragen doe je door slimme vragen te stellen en de juiste houding aan te nemen.
Het spel is ontwikkeld door Telltale Games en gebaseerd op de populaire CSI-serie. De plot is onvoorspelbaar en combineert vijf verschillende zaken tot één complexe zaak vol verrassende wendingen.